Peter Benjamin Parker patřil k neobyčejným středoškolským studentům, talentu drobného obrýleného mladíka si však všiml málokdo. Až do svých šestnácti se Peter zajímal pouze o vědu, fotografování a Mary Jane Watsonovou, pohlednou spolužačku ze sousedství. Klíčový moment jeho života nastal, když ho během exkurze v laboratoři kousl geneticky zmutovaný pavouk. Peter brzy zjistil, že se mu zlepšil zrak, dovede šplhat po stěně i po stropě a je velmi hbitý a silný. A také pochopil, že nedokáže nečinně přihlížet řádění newyorských zločinců. Bere na sebe druhou identitu a stává se Spider-Manem. Drobní kriminálníci mají o důvod víc, proč zanechat řemesla, na Spider-Mana však začínají útočit nepřátelé mnohem většího kalibru: Green Goblin, Doctor Octopus a mnozí další. Během všech Spider-Manových soubojů se zločinci Peter Parker proplouvá životem, jak se dá. Celkem bez potíží zvládl střední školu, přesunul se na univerzitu a začal si přivydělávat jako fotograf pro noviny Daily Bugle.
Tobey Maguire před prvním dílem Spider-Mana vynikl nejen jako člen party kolem Leonarda DiCapria (společně účinkovali ve snímcích Dospívání po americku a Don's Plum Bar), ale také ve filmech Anga Leeho Ledová bouře a Jízda s ďáblem či v dramatu Lasseho Hallströma Pravidla moštárny. Zazářil též ve filmech režiséra Garyho Rosse Pleasentville: Městečko zázraků a Seabiscuit.
Mary Jane Watsonová byla jednou z nejhezčích dívek na střední škole a tak nepřekvapí, že se do ní zakoukal Peter Parker. Ona sama však Peterovu existenci zaznamenala až mnohem později, raději se věnovala svalovci Flashovi a snění o kariéře modelky a herečky. Poté, co na sebe Peter oblékl kostým Spider-Mana, vzrostlo také jeho sebevědomí a dokázal s Mary Jane stále častěji komunikovat. Po střední škole Mary Jane chodila s Peterovým nejlepším kamarádem Harrym Osbornem a v jejím životě se objevil ještě další muž, tajemný Spider-Man. V něm najde Mary Jane nakrátko zalíbení, brzy ale pochopí, že tím pravým je pro ni její kamarád Peter Parker. Ten ji ale odmítne, snad proto, že nedovede skloubit kariéru superhrdiny s milostným životem. Mary Jane si tedy najde nového partnera, i přes vztah s astronautem Johnem Jamesonem stále myslí na Petera. V momentu, kdy se Peter rozhodne skoncovat s kariérou Spider-Mana a vyznal Mary Jane lásku, se ale na scéně objevuje padoušský Doctor Octopus. Začátek romance mezi Mary Jane a Peterem se tak opět odkládá.
Kirsten Dunstová se z pozice oblíbené dětské herečky (Malé ženy, Interview s upírem, Jumanji) dokázala propracovat k hvězdné kariéře i mezi dospělými. Zazářila v několika teenagerských snímcích (Bravo, girls!, šílená/krásný) a v dramatech Úsměv Mony Lisy či Muž, který zabil.
Po smrti Peterových rodičů se o malého sirotka stará jeho teta May Parkerová společně se svým manželem Benem. Pro postarší bezdětnou dvojici nebylo problémem přijmout Petera za vlastního. Po smrti Peterova strýčka Bena na všechno zůstala teta May sama, svou péči nyní soustředí na Petera. Ten ví, že se tetička o jeho spider-manovské identitě nesmí nic dozvědět, mimo jiné proto, že by to mohlo ještě zhoršit její zdravotní problémy.
Angličanka Rosemary Harrisová se více než půlstoletí objevuje v nejrůznějších filmových a hlavně televizních produkcích. V počátcích kariéry účinkovala především v televizních adaptacích klasiků (Shakespeara, Čechova…), později hrála také ve sci-fi Hoši z Brazílie (1978), životopisu Tom & Viv (1994), za nějž byla nominována na Oscara, či komedii Dohola? (2001). K Shakespearovi se v roce 1996 vrátila hereckou účastí v Branaghově Hamletovi a v dokumentu Al Pacino - Richard III.
Benjamin Parker, bývalý tovární dělník, se nejvíce zasloužil o výchovu malého Petera. Ben si brzy všiml změn, které u Petera po kousnutí pavoukem nastaly a varoval ho, že s velkou mocí, kterou získal, vzrostla také jeho odpovědnost. Peter však na jeho radu zpočátku nedbal a byl za to potrestán. Lehkovážně nechal uniknout zloděje, který později strýčka zabil. Peter tak za cenu velké oběti pochopil, že se musí postavit newyorskému podsvětí.
Již téměř osmdesátiletý Cliff Robertson herecky debutoval v roce 1943 válečným filmem We've Never Been Licked. V polovině padesátých let patřil k vyhledávaným představitelům vedlejších rolí (Piknik u cesty). Na vrcholu byla Robertsonova kariéra v šedesátých letech, hrál například mladého JFK ve válečném dramatu PT 109 (1963). Za výkon ve sci-fi Charly získal Robertson Oscara. Z jeho pozdějších filmů zmiňme drama Star 80 (1983) či sci-fi Útěk z L.A. (1996).
John Jameson. Syn vydavatele newyorských novin Daily Bugle J. Jonaha Jamesona je jednou z lásek Mary Jane Watsonové, oba byli dokonce jeden čas zasnoubeni. Avšak poté, co Mary Jane pochopila, že stále miluje Petera Parkera, její vztah s Johnem vzal za své. John Jameson pracuje jako astronaut a jedna z jeho misí zásadně změnila jeho život. V comicsové předloze totiž Jameson nalezl na Měsíci mimozemský artefakt, jenž způsobil, že se Jameson během úplňku mění v bytost přezdívanou Man-Wolf. John se však nestal pronásledovaným zločincem, jak by se mohlo zdát, ale rozhodl se spolupracovat se superhrdiny.
Daniel Gillies získal v roli Johna Jamesona svou prozatím největší hereckou příležitostí. Zatím se objevil v detektivním televizním seriálu Street Legal (2000-2002) či ve vedlejších rolích v thrilleru Nikdo tě neuslyší (2001) a v pohádkovém příběhu Kai a Gerda (2002). V brzké budoucnosti se Gillies objeví v romanci Head in the Clouds s Charlize Theronovou.
